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離子排阻色譜柱可以反沖嗎？

發(fā)布時間：2017-03-22 點擊次數(shù)：1185次

? ??離子排阻色譜柱上基本都有“-->”標(biāo)志，表示流動相的流動方向，有的在色譜柱上印有“Nerver Lot Flow in the OppositeDirection”字樣，翻譯成“決不能反沖”的意思，色譜柱可以反沖嗎、色譜柱能不能反沖的問題爭議很大，但在我們工作中，用色譜柱反沖技術(shù)修復(fù)色譜柱收到柱效提高、柱效恢復(fù)的效果。

? ? 離子排阻色譜柱使用一段時間后柱效下降，此時可拆下柱入口端螺帽，去掉1-2mm被污染填料，再用相同填料填滿，然后用流動相反沖一下，可使柱效恢復(fù)，因反沖可以改善柱頭死空間。

因反沖可把沉積在過渡板上的細(xì)微顆粒沖走，有時也可用反沖技術(shù)使柱壓降低。

一些反沖離子排斥色譜柱的方法：

一、如果是已經(jīng)保存好的色譜柱：

? ? ? ?1、反向接柱，先用 95 水：5 乙腈， 0.2 ml/min流速，沖 20 倍柱體積；

? ? ? ? 2、然后用四氫呋喃，0.2 ml/min流速，沖 20 倍柱體積；

? ? ? ? 3、最后用 95 乙腈：5 水，0.2 ml/min，沖 20 倍柱體積；

? ? ? ? 4、正向接柱，用 65%乙腈水保存色譜柱。

二、如果是剛走完樣的色譜柱，那么請按照下列步驟進(jìn)行：

? ? ? ? 1、卸掉保護(hù)柱

? ? ? ? ?2、正向接柱，常規(guī)方法沖洗色譜柱（先 95水，后 95 乙腈或甲醇）；

? ? ? ? ?3、反向接柱，先用 95 水：5 乙腈 0.2 ml/min，沖 20 倍柱體積；